De acordo com o Manual de Normas Técnicas e Rotinas Operacionais do Programa Nacional de Triagem Neonatal o teste do pezinho deve ser idealmente realizado entre o 3º e 7º dia de vida.
Nunca antes de 48 horas de vida, pois os resultados podem não ser confiáveis. Se, por algum motivo especial, o exame não puder ser realizado no período recomendado, deve ser feito em até 30 dias após o nascimento.
No estado do Rio Grande do Sul, o teste do pezinho faz a detecção de Fenilcetonúria, Hipotireoidismo Congênito e Anemia Falciforme.